9-1 吸光光度法

重点：1. 朗伯-比尔定律    2. 分光光度法

难点：对物质对光吸收定律的理解

教学目标：理解光的吸收定律，了解光的本质与颜色、光吸收曲线。

教学内容：

一、光的性质及物质对光的吸收定律

二、比色法和分光光度法

三、分光光度法的应用

9-1 吸光光度法

一、光的性质及物质对光的吸收定律

1. 光的性质：

（1）光是一种电磁波，具有波动性和粒子性。

（2）光的最小单位为光子，光子的能量E与频率ν成正比，与波长λ成反比。不同波长的光具有不同的能量。

2. 光吸收曲线：将不同波长的光依次通过固定浓度的有色溶液，然后用仪器测量每一波长下相应光的吸收程度（吸光度，A），以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，可得光吸收曲线。例：高锰酸钾溶液的光吸收曲线。

3. 物质对光的吸收定律：朗伯-比尔定律

数学表达式为： A = lgI0/I = kcb

表达式物理意义：当一束单色光平行照射并通过均匀的、非散射的吸光物质的溶液时，溶液的吸光度A与溶液浓度c和液层厚度b的乘积成正比。

其中：k是摩尔吸光系数，与入射光的波长、物质的性质和溶液的温度等因素有关。在吸光光度分析中，能常把I0/I称为透光率，用符号T表示，则该定律可表达为：A=lgI0/I=-lgT

二、比色法与分光光度法

1. 目视比色法：直接用眼睛观察，比较溶液颜色深浅以确定物质含量的方法。

2. 分光光度法：利用分光光度计来进行测定。

（1）工作曲线法或标准曲线法

（2）标准试样计算法或比较法

分光光度法特点：

（1）可得到十分精确细致的吸收光谱曲线，分析结果的准确度较高。

（2）吸光度具有加和性，可以同时测定溶液中两种或两种以上的组分。

（3）由于入射光的波长范围扩大，只要被测物质在红外或紫外区有吸收峰，都可用分光光度法。

3. 分光光度计：

三、吸光光度法的应用实例：

1. 微量磷的测定

2. 微量铁的测定