实验十 还原糖的测定

实验目的：

1. 学会用3，5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖的含量。

2. 掌握标准曲线的绘制方法和分光光度计的使用方法。

实验原理：

3，5-二硝基水杨酸与还原糖共热后，被还原成红色的氨基化合物。在一定范围内，还原糖的量与棕红色的深浅成比例关系，可用比色法测定糖的含量。此法的优点是操作简便、快速，杂质干扰较小。

实验仪器及试剂：

仪器：分光光度计、恒温水浴锅、大试管、比色管、容量瓶、吸量管、量筒。

试剂及药品：香蕉、DNS试剂(3，5-二硝基水杨酸)、葡萄糖标准溶液、6mol/L HCl溶液、10% NaOH溶液

实验内容及步骤：

1. 样品中还原糖的提取

准确称取2g 左右新鲜（香蕉、蔬菜等），或 0.1g 干样品，剪碎或研碎，放入大试管中，加水20ml, 在沸水中加热提取20min 左右，冷却后过滤入250ml 容量瓶中，水洗残渣 2-3 次，定容至刻度，备用。若为山芋粉等淀粉类物质，提取时放入50摄氏度水浴中加热，其他过程与上同。

2. 样品测定

实验结果及分析：

(1)标准曲线的测定：以葡萄糖含量为横坐标，吸光度（A）值为纵坐标，绘制标准曲线后，查得样品含糖量数值。

(2)还原糖含量计算

 V: 测定时所用还原糖液的体积。

表一：